Kërpudhat (kërpudhat) gjenden gjerësisht në natyrë. Edhe pse rreth 400,000 lloje janë përshkruar deri më sot, vetëm 100-150 prej tyre mund të shkaktojnë infeksion te njerëzit. Sëmundjet e shkaktuara nga kërpudhat quhen mykoza. Dega e shkencës që studion kërpudhat dhe sëmundjet kërpudhore quhet mikologji.
Kërpudhat janë mikroorganizma me strukturë eukariote. Meqenëse nuk përmbajnë klorofil, ato nuk mund të kryejnë fotosintezën dhe ndryshojnë nga bimët me këtë veçori. Ato janë anaerobe fakultative ose aerobe të detyrueshme. Kërpudhat janë mikroorganizma heterofilë, që do të thotë se përdorin komponime organike si burime karboni dhe energjie. Ata tresin ushqimet duke lëshuar enzima hidrolitike në mjedisin e jashtëm dhe marrin lëndët ushqyese të tretura në qeliza përmes përthithjes.
Disa kërpudha kanë kapsula dhe kanë një strukturë polisakaride. Polisakaridi i kapsulës përbëhet nga të paktën tre polimere të ndryshëm: glukuronoksilomanan, galaktoksilomanan dhe mannoproteinë. Tek kërpudhat, 90% e murit qelizor përbëhet nga polimere polisakaride si kitina, glukani, manani dhe kitozani, dhe 10% përbëhet nga proteina, glikoproteina dhe lipide. Lloji dhe sasia e polisaharideve ndryshon në varësi të specieve të kërpudhave. Muri qelizor i jep formë qelizës, e mbron nga shoku osmotik, është antigjenik dhe ka aktivitet fiziologjik sepse përmban disa enzima. Membrana qelizore është një strukturë dyshtresore e përbërë nga fosfolipide, proteina dhe sterole, të ngjashme me membranat e gjitarëve. Ndryshe nga membrana e gjitarëve, ajo përmban ergosterol dhe zimosterol në vend të kolesterolit. Funksionet e membranës qelizore përfshijnë mbrojtjen e citoplazmës, rregullimin e shkëmbimit të substancave dhe ndihmën e sintezës së kapsulës dhe murit. Vendi i synuar i shumicës së barnave të grupit antimykotik që përdoren sot për qëllime terapeutike është ergosteroli, i vendosur në membranë.
Sporet e kërpudhave janë përgjegjëse për riprodhimin. Riprodhimi ndodh nëpërmjet sporeve seksuale (zigospore, askospore, bazidiospore), spore aseksuale (blastospore, artrospore, klamidospore, makrokonidium, mikrokonidium, sporangiospore) ose paraseksuale. Klasifikimi shkencor i kërpudhave bazohet në sporet seksuale. Sipas pamjes së tyre morfologjike; Ndahet në dy: maja (Candida, Saccharomyces, etj.) dhe myk (Askomicete, Zygomicet, Deuteromycete, etj.).
Izolimi dhe identifikimi i një shumëllojshmërie të gjerë kërpudhash kryhen duke aplikuar metoda të bazuara në kulturë dhe jo të bazuara në kulturë (serologjike, molekulare). Përpara fillimit të trajtimit antimykotik, mostrat klinike duhet të mblidhen në kushte aseptike, të mos vendosen në formalinë dhe të dorëzohen në laborator në kontejnerë sterile me mediumin mbajtës më të përshtatshëm për materialin.
Për shkak të kohës së gjatë për të. rezultatet e kulturës që duhen marrë, vlerësimi i drejtpërdrejtë mikroskopik është i një rëndësie të madhe. Mostrat klinike të dërguara në laborator vlerësohen fillimisht në mënyrë makroskopike dhe informacioni fillestar për praninë e majave ose mykut merret në vlerësimin mikroskopik. Në ekzaminimin e drejtpërdrejtë mikroskopik, KOH përdoret në masën 10-20-30%, përgjithësisht 30%. Gërvishtjet e lëkurës dhe thonjve, pupla, qime, leshi, copa lëkure etj. KOH u shtohet materialeve të mbledhura për të shpërbërë shtresën e kitinës dhe për të zbuluar hifet kërpudhore. Për ekzaminim mikroskopik të njollosur, përdoren ngjyra të tilla si njolla gram, blu pambuku laktofenol, e bardhë kalkofluor, bojë India, argjendi me mataminë Grocott-Gomori, acid pirodik-Schiff (PAS), Giemsa, Wright dhe Mason-Fontana. Drita e drurit mund të përdoret gjithashtu për të kërkuar kërpudha në sipërfaqe të infektuara. Është një rreze ultravjollcë që kalon nëpër një filtër oksidi nikel. Nën këtë dritë, disa kërpudha mund të identifikohen duke dhënë ngjyra të tilla si fluoreshenca e verdhë e zbehtë, jeshile, e verdhë dhe fluoreshenca e kuqe koralore.
Kultura është një metodë diagnostike më specifike sesa e drejtpërdrejtë. mikroskopi. Zbatohet kur nuk mund të bëhet një diagnozë përfundimtare ose për të përcaktuar llojin e kërpudhave. Në vlerësimin e kulturës, morfologjia e kolonive dhe ngjyra e pigmentit që rezulton janë prioritet. Mjetet e përdorura ndryshojnë në varësi të mostrës klinike të marrë. Mediat kulturore ndahen në qëllime parësore të izolimit dhe qëllime specifike.
Qëllimet parësore të izolimit;
- Sabauraud-dekstrozë-agar (SDA) dhe infuzion i zemrës së trurit. agar (BHI); Përdoret për izolimin parësor të kërpudhave saprofitike dhe patogjene. Për mostrat e marra nga mjedise josterile përdoren SDA dhe BHI me antibiotikë. Ato riprodhohen në 1-4 javë në temperaturën e dhomës dhe 37°C dhe formojnë koloni që janë përgjithësisht të bardha ose ngjyrë kremi, kanë një konsistencë të butë dhe janë tipike maja dhe me erë të keqe.
-Agar frenues myku dhe Fosfi i ekstraktit të majave. agar kali; Izolimi primar i kërpudhave patogjene.
Qëllime specifike;
-Pelte me miell misri me Tween 80 dhe blu tripan (MUJ); Diagnoza e klamidospores së Candida albicans,
-Agar transformimi i farës së pambukut; Transformimi i Blastomyces dermatitidis nga faza e mykut në fazën e majave,
-agar Czapek; Izolimi i Aspergillus,
Agar i farës së shpendëve (Staib agar); Izolimi i Cryptococcus neoformas,
-CHROMagar Candida; Izolimi i specieve Candida bazuar në formimin e reaksionit enzimatik,
-Supë e fermentimit të majave; Vetitë e fermentimit të majave,
-Agar azot maja; Vetitë e asimilimit të karbohidrateve të majave.
Përveç kësaj, metodat BACTEC dhe BacT/Alert përshpejtojnë zbulimin e kërpudhave në kulturat e gjakut.
Germ -Tube Test; Në këtë test, kërkohet formimi i tubit embrional nga qelizat. Një suspension i lehtë i mikroorganizmave të ngjashëm me maja bëhet në 0,5-1,0 ml serum steril dhe inkubohet në 37°C për 2-4 orë. Një pikë e përzierjes vendoset në rrëshqitje dhe mbulohet me një mbulesë. Në mikroskop hetohet nëse tubi i mikrobeve është formuar nga qelizat. Kjo situatë është karakteristike për C. albicans.
Testet për zbulimin e antigjeneve fungale ose metabolitëve në serum ose lëngje trupore janë më të vlefshme për diagnozën serologjike të infeksioneve fungale sistemike. Antitrupat mund të zbulohen me anë të metodave të aglutinimit me lateks (LA), ELISA, Enzima Immuno Assay (EIA), Radioimmuno Assay (RIA), imunoelektroforezë (IE) dhe imunodifuzion (ID). Me këto metoda, antigjenet në strukturën qelizore ose metabolitët; manan, D-arabinitol, (1-3)-β-glukan, polisaharid glukoroksilomanan, galaktomannan dhe enolaza mund të zbulohen.
Megjithëse metodat e diagnostikimit molekular janë gjithnjë e më të njohura, aplikimi i tyre si një metodë rutinë në çdo klinik laboratori është për arsye ekonomike dhe nuk është i zakonshëm për shkak të mungesës së standardizimit. Për zbulimin dhe identifikimin e kërpudhave infektive përdoren metoda të amplifikimit të sinjalit duke përdorur sondat e amplifikimit të acidit nukleik dhe hibridizimit. Teknologjitë e amplifikimit të acidit nukleik përdorin reaksionin zinxhir polimerazë (PCR) ose metoda të ngjashme. Ngarkesa fungale është shumë e ulët dhe kultura dhe diagnoza serologjike nuk janë ende të disponueshme. Mund të thuhet se metodat diagnostikuese të bazuara në PCR do të jenë shumë më efektive në fazën e pamjaftueshme. PCR-ja e transkriptazës së kundërt (RT) synon të përforcojë ARN-në e synuar.
Lexo: 0
